Пандемия COVID-19 высветила необходимость быстрого и точного обнаружения нуклеиновых кислот на месте оказания медицинской помощи. Чтобы удовлетворить эту потребность, ученые из Института биомедицинской инженерии и технологий Сучжоу разработали новую платформу быстрого обнаружения нуклеиновых кислот SARS-CoV-2 без амплификации, основанную на иммуноанализе гибридной флуоресценции (HC-FIA).

Использование моноклонального антитела S9.6 является отличительной особенностью этого процесса, который распознает двухцепочечные гибриды ДНК-РНК и позволяет преобразовать тестирование нуклеиновой кислоты в иммунофлуоресценцию на простой индикаторной полоске с боковым потоком.

Вся процедура теста включает два этапа, а именно гибридизацию и иммунофлуоресцентный анализ, и его можно завершить менее чем за час.

В процессе используются оптимизированные ДНК-зонды для нацеливания на консервативную открытую рамку считывания 1ab, белок оболочки и нуклеокапсидные области генома SARS-CoV-2, полученные из клинических образцов мазка из горла.

Предел обнаружения составляет 500 копий / мл, что сравнимо с коммерческими наборами, основанными на количественной полимеразной цепной реакции (КПЦР) в реальном времени. Кроме того, не было обнаружено значительных перекрестных реакций между зондами SARS-CoV-2 и 55 распространенными патогенами.

На работу реагента для обнаружения HC-FIA не влияют гемоглобин, муцин и различные возможные лекарственные препараты, которые могут присутствовать в клинических образцах. Этот набор для анализа и тестов также может быть адаптирован для обнаружения других вирусных РНК.

Описанный здесь процесс HC-FIA был поддержан рандомизированным двойным слепым испытанием с участием 734 образцов. Текущее исследование не только представляет собой доказательство концепции, но и привело к разработке коммерческого тестового набора для диагностики SARS-CoV-2.

Тестовый набор был недавно одобрен Национальным управлением медицинских продуктов и получил европейский сертификат соответствия.

Набор для тестирования требует немного оборудования и профессионального персонала для подтверждения инфекции. Он может функционировать как «лаборатория-чемодан» и, таким образом, использоваться как метод обнаружения на месте для амбулаторных отделений, отделений неотложной помощи, таможни и контроля заболеваний на низовом уровне.

Мы уверены, что тест HC-FIA может служить надежной гарантией сдерживания эпидемии за счет сокращения распространения среди населения и завозных случаев, особенно в развивающихся странах ».

Ван Даминг, ведущий научный сотрудник, штаб-квартира Китайской академии наук